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[主观题]
当两种限制酶反应条件不同时，若要用双酶切，应采取什么措施？为什么？
提问人：网友15***596
发布时间：2022-01-07
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第1题
如图所示，某质粒载体带有TetR（四环素抗性）和AmpR（氨苄青霉素抗性）基因，在TetR基因内部有一个BamHI和一个EcoRI酶切位点。P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。请根据上述信息分析回答下列问题。 （1）为了防止目的基因和质粒载体的酶切产物发生任意连接，酶切时应选用什么酶？ （2）酶切载体与目的基因连接后转化，此时涂平板应加什么抗生素？ （3）怎样筛选出含有插入片段的重组子？请设计一个简单方案。
第5题
用特定的限制性内切酶酶解双链DNA产生DNA片段长度的分析适合构建物理图谱，因为：
A．哪怕只用一种限制酶，DNA的线性化也允许直接确定限制性片段的顺序。
B．内切酶在等距离位点切割DNA，产生了机体特异性的片段长度。
C．DNA的线性化意味着限制性片段长度加起来的总和等于DNA的总长度，凭借双酶切产生的重叠片段可建造明确清楚的物理图谱。
D．这些限制性内切核酸酶的活性，以某种特异性方式被限制。
E．这种技术同时提供核苷酸顺序方面的广泛信息。
