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[主观题]

一个理想的克隆载体应有的特性()。A、分子量小、多拷贝、松弛控制型B、具有多种常用的限制性内切

一个理想的克隆载体应有的特性()。

A、分子量小、多拷贝、松弛控制型

B、具有多种常用的限制性内切酶的单切点

C、能插入较大的外源DNA片段

D、具有容易操作的检测表

E、以上都是

提问人:网友xufeng1129 发布时间:2022-01-06
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第1题
一个理想的克隆载体应有的特性()。A、分子量小、多拷贝、松弛控制型B、具有多种常用的限制性内切

一个理想的克隆载体应有的特性()。

A、分子量小、多拷贝、松弛控制型

B、具有多种常用的限制性内切酶的单切点

C、能插入较大的外源DNA片段

D、具有容易操作的检测表

E、以上都是

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第2题
根据慕课视频,写一份实验报告(实验目的 原理 材料和试剂 步骤),完成思考题(1 什么是质粒?2 一个理想的质粒克隆载体应具有哪些特点?)
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第3题
就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必须包括三个部分:______、______、______。另外,一个理想的

就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必须包括三个部分:______、______、______。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子质量。

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第4题
理想的克隆载体应具备的条件有:

A.在宿主细胞中自主复制,大量扩增

B.具有多克隆位点

C.具有筛选标记基因

D.分子量不能太大

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第5题
打算将一个cDNA克隆到一个表达载体,以便在E.coli中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA的两侧具有BamH Ⅰ的位点,
因此计划将它从BamH Ⅰ的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行:载体用BamH Ⅰ切割以后,立即用碱性磷酸酶处理除去5'磷酸;接着将处理过的载体同用BamH Ⅰ切割的cDNA片段混合,加入DNA连接酶后进行温育,连接之后,将DNA同已处理过的可以接受DNA的细菌感受态细胞混合。最后,将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因,所以,转化的细菌能够存活。

实验中同时设置了四个对照:

对照1:将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。

对照2:将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。

对照3:将经切割(但未用碱性磷酸酶处理)并用连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。

对照4:将经切割(并用碱性磷酸酶处理过)并用DNA连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。

在进行第一次实验时,感受态细胞不是自己制备的,结果在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落(表Q25.2)。在第二次实验中,自己制备感受态细胞,但这一次,所有的平板上都没有菌落生长(表Q25.2)。接着又进行了第三次实验,这次得到了转化子(表Q25.2)。从实验平板上挑出12个菌落,分离了质粒DNA,并用BamH Ⅰ进行切割,其中9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带,另三个克隆中切出一个cDNA片段,实验终于获得成功。

表Q25.2 cDNA克隆的结果

制备的样品

实验结果

1

2

3

对照1 只有细胞

TMTC

0

0

对照2 未切的载体

TMTC

0

>1000

对照3 省去磷酸酶处理,无cDNA

TMTC

0

435

对照4 无cDNA

TMTC

0

25

实验样品

TMTC

0

34

注:TMTC=too many to count,多到无法计数。

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第6题
一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么?
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第7题
作为克隆载体的质粒应具有一个以上的______,便于对宿主细胞进行选择。
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第8题
一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么?

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第9题
当前在分子克隆中所用的质粒克隆载体必须具有哪些特性?
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第10题
请写出至少四点作为基因克隆载体必须具备的特性。 ()
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第11题
良好产酶性能的基因工程菌株,必须具备良好的宿主-载体系统,理想宿主应具备哪些特性?
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