科斯质粒和凯隆载体都是由E.coli的λ温和噬菌体构建成的外源基因载体。()
科斯质粒和凯隆载体都是由E.coli的λ温和噬菌体构建成的外源基因载体。( )
科斯质粒和凯隆载体都是由E.coli的λ温和噬菌体构建成的外源基因载体。( )
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
迄今为止,一切基因工程的载体都是由()来充任。
A.细菌质粒或病毒
B.线状DNA
C.细菌质粒
D.V病毒
A.容量最大的一种载体
B.由λ -DNA 的 cos 区与质粒重组而成的载体
C.是一种单链DNA环状载体
D.不能在受体细胞内复制,但可以表达的载体
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