细菌进行转化时要处于感受态,下列关于获得细菌感受态说法错误的是__________。
A.可以通过改变某些生长条件获得
B.要选择适宜的培养时间来获得
C.不能采用CaCl2处理获得
D.可以使用cAMP诱导获得
A.可以通过改变某些生长条件获得
B.要选择适宜的培养时间来获得
C.不能采用CaCl2处理获得
D.可以使用cAMP诱导获得
实验中同时设置了四个对照:
对照1:将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。
对照2:将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。
对照3:将经切割(但未用碱性磷酸酶处理)并用连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。
对照4:将经切割(并用碱性磷酸酶处理过)并用DNA连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。
在进行第一次实验时,感受态细胞不是自己制备的,结果在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落(表Q25.2)。在第二次实验中,自己制备感受态细胞,但这一次,所有的平板上都没有菌落生长(表Q25.2)。接着又进行了第三次实验,这次得到了转化子(表Q25.2)。从实验平板上挑出12个菌落,分离了质粒DNA,并用BamH Ⅰ进行切割,其中9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带,另三个克隆中切出一个cDNA片段,实验终于获得成功。
表Q25.2 cDNA克隆的结果
制备的样品 | 实验结果 | ||
1 | 2 | 3 | |
对照1 只有细胞 | TMTC | 0 | 0 |
对照2 未切的载体 | TMTC | 0 | >1000 |
对照3 省去磷酸酶处理,无cDNA | TMTC | 0 | 435 |
对照4 无cDNA | TMTC | 0 | 25 |
实验样品 | TMTC | 0 | 34 |
注:TMTC=too many to count,多到无法计数。
因为表达载体中含有抗性基因,能表达抵制抗生素的酶,所以只有含有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长,而未被转化的细菌则因受到抗生素的抑制而死掉。
你还参照实验手册做了下面四组对照:
对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的(即不含有载体的)大肠杆菌感受态细胞(cells alone)。
对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞,将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面(vector alone)。
对照三、用BamHI酶切载体DNA后,不用碱性磷酸酶处理,不需要cDNA,直接加入DNA聚合酶,然后转化、涂板(Omit phosphatase,omit eDNA)。
对照四、除使用碱性磷酸酶外,其它与对照三相同(Omit cDNA)。
你一共做了三次实验,在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结果,转化成功,具体克隆数见下表:
Preparation of Sample | NO.of Colonies | |||
1 | 2 | 3 | ||
Control 1 | Ceils alone | TMTC | 0 | 0 |
Control 2 | Uneut vector | TMTC | 0 | >1000 |
Control 3 | Omit phosphatase,omit cDNA | TMTC | 0 | 435 |
Control 4 | Omit CDNA | TMTC | 0 | 25 |
Experimental sample | TMTC | 0 | 34 | |
TMTC=too many to count |
请回答下列问题:
B.属于典型的急性时相反应蛋白
C.血浆中 CRP浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著地增高
D.在钙离子存在下, CRP 可 结合多种细 菌 、真菌及原虫等体内的多糖物质
E.电泳迁移率易受如钙离子及缓冲液的成 的 影响
A、需要完全缺陷噬菌体或部分缺陷噬菌体为媒介
B、不需要噬菌体做媒介
C、受体菌可以获得供体菌部分遗传性状
D、转导包括普遍性转导和局限性转导
为了保护您的账号安全,请在“简答题”公众号进行验证,点击“官网服务”-“账号验证”后输入验证码“”完成验证,验证成功后方可继续查看答案!