以下关于碱法提取质粒DNA描述正确的是()。
A.碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。
B.碱裂解法提取的质粒DNA分子全部具有超螺旋结构。
C.染色体DNA与蛋白SDS钾盐结合在一起形成微溶性复台物, 离心后沉淀中合有染色体DNA ,而上清中含有质粒DNA。
D.碱裂解法提取质粒 DNA 的原理是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性基因组 DNA 之间 在拓扑学上的差异来实现分离的。
A.碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。
B.碱裂解法提取的质粒DNA分子全部具有超螺旋结构。
C.染色体DNA与蛋白SDS钾盐结合在一起形成微溶性复台物, 离心后沉淀中合有染色体DNA ,而上清中含有质粒DNA。
D.碱裂解法提取质粒 DNA 的原理是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性基因组 DNA 之间 在拓扑学上的差异来实现分离的。
A、溶解琼脂糖
B、增加样品比重,以确保DNA均匀沉入加样孔内。
C、溶液两极的pH保持基本稳定。
D、使样品呈色,使加样操作更方便。
E、预测核酸电泳的速度和位置。
F、螯合Mg2+等阳离子,使DNA酶失活。
A、42℃热激后,要放到冰浴2min再进行下一步实验
B、在复苏过程中,加入的是无抗的LB液体培养基
C、在感受态细胞中加入连接产物后,直接进行42℃热激90s
D、热激法转化大肠杆菌时,感受态细胞经历了0℃-42℃-0℃的过程
A、Taq酶扩增效率高;Pfu酶扩增效率低
B、Taq酶无3’-5’ DNA外切酶活性保真性差;Pfu酶具3’-5’核酸外切酶活性保真性高
C、Taq酶扩增产物末端有A;Pfu酶扩增产物末端没有A
D、Taq酶扩增和Pfu酶扩增效率相似
A、由于PCR灵敏度非常高,所以应当采取措施以防反应混合物受到污染。
B、操作中所用的PCR管、离心管、吸管头等都只能一次性使用。每加一种反应物,应换新的枪头。
C、设置严格的阳性对照和阴性对照。
D、注意不能有RNA酶的污染。
A、回收率低可能是因为溶解不充分,造成一部分目的基因存在于胶中
B、紫外灯下切胶时间过长,使DNA部分降解
C、回收前样品太少导致回收率低
D、洗脱次数太少,有目的基因没有被洗脱下来
A、限制性内切酶的识别位点一般是相同碱基排列的序列
B、主要存在于原核生物中
C、有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率是相同的
D、同裂酶两种酶切割序列不完全相同,但却能产生相同的粘性末端,而同尾酶识别核苷酸顺序项同但切割位置不一定相同
A、可插入大片段的外源基因
B、费用昂贵,且重复性不好
C、操作简单,不需要特殊仪器
D、T-DNA可以在目标宿主植物染色体的任何区域插入
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