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“E.Coli”是一种A.肺炎球菌B.系统真菌C.革兰阳性杆菌D.革兰阴性杆菌E.病毒
“E.Coli”是一种
A.肺炎球菌
B.系统真菌
C.革兰阳性杆菌
D.革兰阴性杆菌
E.病毒
“E.Coli”是一种
A.肺炎球菌
B.系统真菌
C.革兰阳性杆菌
D.革兰阴性杆菌
E.病毒
聚合酶最初识别并结合的DNA区域;
聚合方向;
聚合酶在模板链上移动方向;
向生长链中加入的核苷酸底物;
反应机制;
反应产物;
聚合速率;
校正能力(有或无)。
首先你得切载体DNA,且用碱性磷酸酶去除5'-磷。第二步,把处理过的载体与BamHI切出的cDNA片段混合加入连接酶后温育,连接后将它与感受态细胞混合。最后,将混合物涂布在含抗生素的固体培养基上,杀死所有未转入载体的细胞,而转入了载体的细胞由于其抗生素抗性而存活下来。
克隆手册上提到了四种对照:①未和连接混合物混合的细菌涂平板;②转入未切过的载体的细胞涂平板;③酶切过但未用碱性磷酸酶去除5'-磷的载体,未加外源cDNA片段但加连接酶温育的混合物与感受态细胞混合涂平板;④载体酶切过,碱性磷酸酶处理过,无cDNA片段加连接酶温育后和感受态细胞混合涂平板。
第一次做该实验的实验组和四个对照组借用同宗的感受态细胞,但所有平板上菌落太多而无法数清(见表16-3-40)。第二次做时,采用自己准备的细胞,但没有一个平板上有菌落长出。你又做了一次,这次的结果见表16-3-40。你从样品中挑了几个菌落,提取质粒DNA后用BamHI处理,有九个菌落生成和线状载体相同大小的一条带,但另三个菌落含有你需要克隆的cDNA片段。
表16-3-40 Results of Your cDNA Cloning Endeavor | ||||
样品制备 | 实验结果 | |||
1 | 2 | 3 | ||
对照1 对照2 对照3 对照4 实验样品 | 只有细胞 未切的载体 无磷酸化酶、无cDNA 无cDNA | TMTC TMTC TMTC TMTC TMTC | 0 0 0 0 0 | 0 >1000 435 25 34 |
TMTC=too many to count |
A.代谢活化成终致癌物过程的中间代谢产物
B.不经代谢活化即有致癌活性的物质
C.需经代谢活化才有致癌活性的物质
D.兼有引发(启动)、促长、进展作用的物质
E.经代谢转化最后产生的有致癌活性的代谢产物
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