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[主观题]

有一长的线状DNA分子,分子的一端按卷绕的逆方向相对于另一端旋转四周。然后两端连接起来。如果要使分子保持卷

绕不足的状态,需断裂多少个碱基对?如果让分子形成超螺旋,会出现多少个结节(node)?
提问人:网友anonymity 发布时间:2022-01-06
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第1题
制备闭合环状和双螺旋DNA分子,其中一条链含15N和13C(“...

制备闭合环状和双螺旋DNA分子,其中一条链含15N和13C(“重链”),另一条链含14N和12C(“轻链”)。如用下述方法对DNA进行处理,再在中性pH条件下进行CsCl密度平衡离心,试问两条链将如何分布?

A.置于碱溶液(pH13)或在水中煮沸。

B.用足量的核酸内切酶处理,使每条链出现2~3个切口。

C.同B,但接着置于碱溶液或在水中煮沸。

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第2题
许多DNA分子的一条链上有长段的嘧啶(自然,另一条链上有长段的嘌呤)。如果将DNA在多聚核糖嘌呤存在的条件下变性,然后在硫酸铯溶液中进行浮力密度离心至平衡,该变性DNA经常形成两条带。已知RNA的密度大约比DNA的密度大0.100g/ml。试解释为什么出现两条带,每条带是什么物质,如果多聚核糖嘌呤的分子量增加,两条带的分离程度会增加还是降低?
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第3题
线状噬菌体DNA分子与除中央10%缺失外其余完全相同的分子杂交。

A.在电镜下看到的该异源双链呈何结构?

B.若所缺失的10%片段被一段长度相同的非同源细菌DNA取代,该异源双链的结构如何?若以上非同源细菌DNA的长度仅为缺失的噬菌体DNA长度之半,则结构有何变化?

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第4题
在高pH(11.3至11.6,因DNA而异)下,dsDNA转变为ssDNA。若DNA含5-溴尿嘧啶(Bu),则临界pH约为10.5。这种转换可由CsCl离心来检测,因为当DNA转变为单链时,其密度增加0.014g/cm3。正常DNA和Bu-DNA也可在CsCl中加以区分,因为后者密度高于前者密度约0.1g/cm3。过去曾认为,大肠杆菌DNA是四链的,由两条双螺旋通过“biunial键”互相连接。这样,Meselson和Stahl观察所得的杂种密度DNA被认为是一个LL双链与一个HH双链结合而成。为得到杂种DNA,将大肠杆菌在含5-溴尿嘧啶的培养基中培养一代,Robert Baldwin和Eric Shooter就能区别BuLDNA和BuBu:LLDNA(即含BuBu和LL的四链DNA)。试作BuL和BuBu:LL这两种DNA的密度pH的曲线。
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第5题
用14N标记的生物A的DNA与等浓度的用15N标记的生物JDNA...

14N标记的生物A的DNA与等浓度的用15N标记的生物JDNA杂交,再在CsCl中离心至平衡。复性DNA总量的5%具杂种密度。以上两种生物的共同碱基顺序的比例是多少?

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第6题
细菌若生长在含重同位素(如15N或13C)的培养基中,其DNA...

细菌若生长在含重同位素(如15N或13C)的培养基中,其DNA可被密度标记。若两链均被标记,则此DNA称为重(HH)DNA,以对应通常的轻(LL)DNA。若等量的HHDNA和LLDNA混合并加热至100℃,再慢慢冷却使之复性,则25%的DNA为HH,25%为LL,50%为HL(杂种分子),假定45mg的HHDNA与5mg的LLDNA混合,加热至100℃,再复性,将产生HH、HL及LLDNA各多少mg?

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第7题
当DNA分子加热时,碱基对破裂;破裂的数量随温度而增加。在临界点温度时,两条链分开。试画沉降系数S随温度变化的曲线,并指出Tm的位置。假定DNA分子处于高离子强度的溶液中,此时单链DNA分子是柔性的。在25℃时DNA的沉降系数用s。表示,高于25℃时用sT表示。
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第8题
用不同种类的变性DNA分子复性来制取杂交DNA时,常常留有一些不能复性的DNA。用哪些方法可除去这些不能复性的DNA?
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第9题
假定你制取了两个DNA样品,一个正常,另一个变性,各用0.01mol/L NaCl溶液透析过。透析前并不知道A260值。然后,每个样品中各加入少量酶,这时,两个样品搞混了。如何用吸收值来区别这两个样品?假定检测中用去了一小部分样品,且酶不会干扰测定。再设计第二种检测方法,确定它不需引入其他试剂或引起变性的条件。
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第10题
据说如果碱基堆集,单链多核苷酸链会呈螺旋状,这种堆集倾向曾用以解释DNA的稳定性。既然单链多核苷酸中的堆集是在邻近碱基之间,如何用堆集来解释双螺旋中的两条链聚合的倾向?
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