质粒DNA转化农杆菌细胞时最常用的转化方法是()。
A.化学试剂法
B.原生质体转化法
C.电转法
D.共培养转化法
A.化学试剂法
B.原生质体转化法
C.电转法
D.共培养转化法
下图表示“华恢1号”抗虫水稻主要培育流程,据图回答: |
(1)杀虫基因通过①-④,最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做_____________。 (2)杀虫基因(crylA)是根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的,这属于____工程技术范畴。 (3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析: |
①.人工改造质粒时,要使抗虫基因能成功表达,还应插入____________。 ②.人工改造质粒时,用限制酶I处理,其目的是:第一,去除质粒上的(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于_______________;第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。 ③.若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的情况是__________________________。 (4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为,则该酶识别的核昔酸序列是______________。 |
A、切下含有目的基因的凝胶时,要衬以干净的塑料薄膜,使用无污染的新刀片,其目的在于防止外源DNA的污染
B、切胶的过程可以长一些,因为在紫外线下长时间暴露不会引起突变
C、把切的两个或多块胶融化后,无论多大体积都用一个管子,转移到一个柱子上可提高胶回收量
D、切胶时,尽可能小的切下来胶块,以便后续实验的进行
A、使用离心机时,一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。
B、电子天平使用时一定要调水平,并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。
C、高压灭菌结束后,压力降到0 Mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。
D、配制EDTA溶液时,EDTA在酸性条件下才能溶解。
A、徒手从微波炉中取出盛有煮沸的琼脂糖溶液的三角瓶。
B、二甲苯腈条带跑出凝胶时停止电泳。
C、将DNA样品滴加在电泳仪的正极端。
D、带上双层手套将凝胶从EB染液中取出。
A、碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。
B、碱裂解法提取的质粒DNA分子全部具有超螺旋结构。
C、染色体DNA与蛋白SDS钾盐结合在一起形成微溶性复台物, 离心后沉淀中合有染色体DNA ,而上清中含有质粒DNA。
D、碱裂解法提取质粒 DNA 的原理是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性基因组 DNA 之间 在拓扑学上的差异来实现分离的。
A、溶解琼脂糖
B、增加样品比重,以确保DNA均匀沉入加样孔内。
C、溶液两极的pH保持基本稳定。
D、使样品呈色,使加样操作更方便。
E、预测核酸电泳的速度和位置。
F、螯合Mg2+等阳离子,使DNA酶失活。
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